資訊中心NEWS CENTER
在發(fā)展中求生存，不斷完善，以良好信譽和科學的管理促進企業(yè)迅速發(fā)展酵母菌是基因表達研究和重組蛋白生產的通用宿主。然而，傳統(tǒng)酶解法進行酵母mRNA和內容蛋白提取通常非常困難。我們以細胞總RNA提取為例，對各種酵母破壁方法進行比較。我們用不同的方法對酵母菌破壁，然后用Trizol試劑進行RNA的提取，zui后進行電泳檢測，發(fā)現不同破壁方法效果如下：
SPEX公司Freezer/Mill冷凍研磨儀將上述液氮研磨法進一步改良，使酵母破壁這樣的實驗更加簡單，無人值守即可完成。將樣品裝入密閉的研磨容器，浸入液氮，采用電磁振蕩技術，電磁往復驅動鋼制撞子，振蕩裝機樣品，動能慣性更大，實現高動能撞子大面積撞擊，快速粉碎研磨。過程中，樣品始終處于液氮溫度（-196°C）。
實驗方法：
*步：將樣品研磨罐預冷凍。
第二步：將酵母菌液加入液氮中，控制速度，使菌液進入液氮中后形成小顆粒。將菌體液氮顆粒轉入研磨罐中。放入冷凍研磨儀的樣品倉。
第三步：設置研磨程序，預冷10-15min，研磨2min，15個循環(huán)，兩次研磨之間間歇1min。
實驗結果：
經檢驗，用此法能使得90%以上的酵母細胞破壁。酵母的RNA和細胞內蛋白保持高活性。
SCROLL
聯系人：高
座機：010-65528800
地址：北京市朝陽區(qū)吉慶里14號佳匯國際A202室
快速導航
產品系列
產品推薦
Copyright©2025 培安有限公司 版權所有 All Rights Reserved 備案號：京ICP備17026558號-1 總訪問量：410051
技術支持：化工儀器網 管理登錄 sitemap.xml
手機：010-65528800